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藤村静(藤村 静(ふじむら しず)，声：北都南/一美/同左)
生日：2月21日。身高147cm，体重41kg。 三围：B76(A)/W50/H74。
1年级学生，学生会干部。没有得到双亲的关怀，和航相遇的时候完全不表露自己的感情。自入学前就以特例入居宿舍，在与航以及其他住宿生的生活之中渐渐表现出感情。似乎满擅长家事，和宫穗一起作菜(宫穗说)时实际上全部的调配都是静所包办的。
羽山海己(羽山 海己(はやま うみ)，声：石川乃奈/森泽芙美/同左)
生日：6月21日。身高158cm，体重48kg。三围：B88(D)/W52/H83。
2年A班班长兼学生会文书。家里和航是隔壁邻居，每天会来叫航起床。生性胆小，常躲在房间的角落啜泣。擅长作菜，在宿舍里负责做饭，经常以体育服装扮整顿后院的家庭菜园。此外因为除了海己以外没有人会作菜(包含寮长)，当海己生病或其他理由无法煮饭时会让鸫寮陷入危机。
六条宫穗(六条 宮穂(ろくじょう みやほ)，声：草柳顺子/中田顺子/同左)
生日：7月31日。身高154cm，体重:44kg。 三围：B82(B)/W51/H81。
1年级学生(1年A班)，学生会干部。学校董事长的孙子，而代理董事长的职务。本来只是个不懂事的千金大小姐，在宿舍中遭遇的各种刺激而逐渐改变。手艺奇差、不会作菜、运动白痴。打蛋时几乎一定会使得蛋黄破掉。特技是冷笑话配上认真的说明，让全场变得尴尬。
周防院奏（すおういん かな，声优：木村あやか／同左／神田朱未）
诞生日：8月26日、血液型：O型、身长：140cm。
隶属于演剧部的一年级生。在宿舍内负责照顾瑞穗的学妹兼干妹妹，特征是头上的大型蝴蝶结与奇妙的口癖
第74代Elder Sister。
一年级生，“樱之庭”住宿生，在度过了2个月没有“姐姐”的时光后，成为了宫小路瑞穗在宿舍的“妹妹”，演剧部成员。头上系着大丝带的小小少女。
平常有些羞涩，但是十分努力，在学校中不断地学习、进步着。说话有着“なのですよ～”（……的说）的奇怪口癖。
有着悲伤的身世……在一年之中，受到了来自瑞穗与紫苑的许多影响。
上冈由佳里（上岡 由佳里（かみおか ゆかり），声优：松永雪希／同左／松本彩乃）
诞生日：2月18日、血液型：AB型、身长：152 cm。
一年级生，“樱之庭”住宿生，是御门玛利亚在宿舍的“妹妹”，田径部成员。相当有朝气的运动少女，同时也擅长料理。
家境一般的外部入学生，因为与重要的人约定才选择就读于圣应女子学院。
隶属于田径部的一年级生。相当有朝气的少女。
最喜欢的食物是各式各样的牛肉饼。非常怕鬼。
凡是看到有人小声议论事情，就会怀疑是在议论自己而疑神疑鬼。
源自于《少女爱上姐姐》，续作《少女爱上姐姐2》中并无出场。
严岛贵子（厳島 貴子（いつくしま たかこ），声优：佐本二厘／同左／高桥智秋）
诞生日：11月16日、血液型：B型、身长：165 cm。
学生会会长。个性十分认真正直的才女，瑞穗入校前Elder Sister最有力的候选人，从小就与麻里亚处得不太好。
由于家庭方面的缘故使她不太喜欢男性，然而本身却在无意识中将瑞穗视为男性（在十一集中发现瑞穗是男性）。除此之外，贵子所属的严岛家与瑞穗所属的镝木家为商业上水火不容的竞争对手。
三年级生，第109届学生会会长。严肃认真、性格干练而严于自律。相当怕鬼。为人正直，作为学生会会长多次与瑞穗站在对立立场上，但并没有针对瑞穗个人的恶意。
由于家族缘故而厌恶男性。对紫苑表现出尊重，在一些事情上会选择退让。
与玛利亚一样自幼在圣应学习，同时和玛利亚的关系自幼而来都极其糟糕，两个人的性格被不少人都评价为极端相似又极端相反。
宫小路瑞穗（宮小路 瑞穂（みやのこうじ みずほ），声优：神村比奈／同左／堀江由衣）
诞生日：5月12日、血型：A型、身高：173 cm。
因祖父的遗言而转校到女学院的“女”主角（真实性别为男性）。本名是镝木瑞穗（かぶらぎ みずほ），为了隠藏原本身份而在学院内使用了母亲的姓。拥有男性少有的美貌和长髪，对武道颇有心得。才色兼备的“她”成为全校学生憧憬的模范大姐姐（エルダー?シスター ／ Elder Sister）而被崇拜。拥有十分认真的性格，以前是不会多理会他人的消极性格，成为“お姉さま”后边累积著经验成长。特征是金色及腰的长发和头上的两根呆毛。
第72代Elder Sister。
本名镝木瑞穗，为了隐藏原本身份而在学院内使用母姓。
留着金色及腰长发的美少年，本作的男主角，因祖父镝木光久的遗言而被迫转入了自家所经营的圣应女子学院，作为三年级的“樱之庭”住宿生在女校度过了一年的时光。其母亲宫小路幸穗也是圣应的学生。
从小受到优良教育（除了禁止下厨以外基本就是当大小姐养），文武双全才色兼备。拥有十分认真而又有点腼腆的性格。
转入时间为2005年6月，因为在替代入学考试的期中考试上取得了优异成绩所以一入学便引发了巨大反响；其后直接在当月末的Elder选举上以史上最高票数成为了受到全校学生仰慕的圣应第72代Elder Sister——对于原本想要不动声色的撑过一年时间的瑞穗而言，这成为了一个巨大的考验。
高岛一子（高島 一子（たかしま いちこ），声优：草柳顺子／同左／后藤邑子）
诞生日：11月24日、血液型：B型、身长：154 cm。
22年前是学院的学生。
很仰慕自己身兼Elder Sister的姐姐宫小路幸穗。但在在学期间身患重病，而幸穗因结婚缘故离校，她不惜带着病重的身躯回到宿舍见姐姐一面，最后还是来不及，在宿舍房中抱着遗憾而终。
因为某种原因成为幽灵在宿舍中穿梭，有结界限制除非得到姐姐陪同，否则不能离开宿舍范围。拥有明亮的性格和浪漫主义者。
是一个很可爱的幽灵，说话语速异常之快，有点儿啰嗦，在不是幽灵也就是生前也就是22年前，是照顾当时的“姐姐大人”的妹妹。而当时的“姐姐大人”，居然就是宫小路瑞穗的母亲... ...在一次夜晚的礼堂里，宫小路瑞穗吻了她的额头后便离开了，后来又不知道为什么又回到了宿舍里。
她有一个很有趣的愿望：想要和姐姐大人结婚，诶，所以她一直都希望姐姐大人是个男孩子，所以得知宫小路瑞穗是个男孩子后，异常兴奋。
栖息于宫小路瑞穗的房间中的幽灵，生前为圣应学生，已经离世22年。可爱的幽灵，语速宛如机关枪的“冒失鬼”，性格明亮的浪漫主义者。
生前体弱多病而常常住院，仰慕着宫小路幸穗，梦想是“与姐姐大人结婚”。在得知幸穗即将毕业并结婚时不惜带着病重的身躯回到宿舍见姐姐最后一面，但最终未能如愿，在幸穗的房间中抱憾而终。而现在幸穗的房间成为了其子瑞穗的房间。
与其说是幽灵不如说是地缚灵更贴切，早期在没有瑞穗陪同的情况下无法脱离宿舍，同时虽然能被人看见但不能被瑞穗以外的人触摸到。
十条紫苑（十条 紫苑（じゅうじょう しおん），声优：木原泉／同左／松来未祐）
诞生日：3月21日、血液型：AB型、身长：173 cm。
瑞穗的同学。有华族家族血统，但有毫不炫耀的性格。在瑞穗转学第一日就识破其男生的身份，但她们却建筑起朋友关系。
成绩优异但由于疾病而留级1年。去年被选为Elder Sister、却认为自己是让Elder Sister一职空置而自责，而支持瑞穗的ELDER活动以拭去自己的错。性格稳重但意外地喜欢恶作剧，经常和玛利亚一起捉弄瑞穗。
第71代ElderSister。
三年级生，瑞穗的同班同学，第71代Elder Sister，花道社的指导，因为身体健康问题导致上一年学业无法正常完成而留级一年。原华族的十条家的独生女。
留着黑色及腰长发的少女，沉稳端庄又有着神秘感，但其实在大多数人看不到的地方有着可爱的一面。
于瑞穗正式开始上学的第一天光速识破瑞穗的男儿身，并与其成为好友。（在这之后对于瑞穗的胸垫表现出特别的兴趣）
为前一年的ELder实质空缺一事感到自责；在瑞穗对成为Elder一事感到困扰时开导瑞穗，全力支持着作为Elder的瑞穗，在许多事上提供了帮助，作为瑞穗坚定的伙伴的存在。
御门玛利亚（御門 まりや（みかど まりや），声优：あおいひとみ／同左／浅野真澄）
诞生日：6月8日、血液型：O型、身长：161 cm。
和瑞穗青梅竹马的亲戚。与紫苑同是华族出身，但和紫苑不同的是她毫不在意大小姐身份的自由奔放的性格。
小时候已经为瑞穗穿女装为乐，这次也很乐意协助瑞穗加入女子宿舍的生活，教授她女孩子应有的仪态及习惯学校生活。在学校社团为田径队。对流行及化妆很有兴趣。喜欢作弄别人，完全不把学生会长贵子放在眼里。
三年级生，学生宿舍“樱之庭”的住宿生兼宿舍长，田径部部长，在学校中有着“茉莉花之君”的称号。瑞穗的堂妹、青梅竹马，小时候以为瑞穗穿女装打扮为乐，镝木光久老先生的遗言的自愿执行人，让瑞穗转入圣应的帮凶。
在学校为瑞穗的宿舍生活提供了许多帮助。教授瑞穗女孩子应有的仪态及习惯学校生活，但实际上自己大大咧咧的没什么大小姐风度。
有时又喜欢捉弄瑞穗，搞得瑞穗团团乱转。
范马勇次郎(範馬 勇次郎(はんま ゆうじろう))
有着“地上最强生物”之称的男人，范马刃牙的父亲。
出生时就命令接生婆不准出错、空手抓住箭毒蛙并在喝母奶时就已经有了犬齿，使各个拥核国家领袖决定保留核子武器。年轻时在世界各地的战场徒手和军队对战，并被士兵们尊称为“Ogre”、“恶魔”。在参加越战时强暴了杰克的母亲、加拿大女兵洁恩，并在十九岁时和刃牙的母亲朱泽江珠结识，让其生下刃牙。同年在东京和要与安东尼奥猪狩比赛的穆罕默德.阿里见面，称对方是自己最尊敬的人。
在刃牙十三岁时与其对决，并在前往之前打倒了来挑战的凯亚，击败刃牙并误杀江珠，而后不知去向。在刃牙十五岁时回到日本，与愚地独步决斗并使出“魔鬼的背肌”将其打败。在最强格斗大赛中带来了美国总统的保镖天内悠，并因为表现不如其意而将天内杀死、大闹比赛而被麻醉枪制伏，醒来后在地下停车场接受杰克的挑战，并将其打败。
第二部时在电视上看到了死刑犯的通缉情报，并且要求死刑犯西可尔斯基绑架梢江，之后在本部以藏和柳龙光的对决中要求柳认输，被拒绝后将其打倒。之后前往中国参加海王大赛，打倒刘海王后，由于郭海皇改变赛制而加入了对决，与郭海皇对决期间阐述自己对于胜负的思想，最后和郭海皇不分高下，被郭海皇承认为“范马海皇”，并相约百年后再战。最后见证了刃牙和阿里Jr.的对决，承认刃牙并接受刃牙的挑战。
第三部开头便杀死了肆虐非洲的巨大非洲象，并嘲笑刃牙和幻想的螳螂对决毫无意义。在刃牙打倒奥利华后和其比较力气并取胜，并在之后前往军方给皮可的住处与其比较，被逼着使出技术取胜。最后和刃牙如一般父子共进晚餐，开始了“史上最大的父子打架”，最后给予刃牙“地上最强”的名号，但刃牙因为耳膜破裂而没听到。
第四部在德川府和宫本武藏对决，被本部以藏的乱入打断。
愚地独步(愚地 独歩(おろち どっぽ))
被尊称为“武神”的空手道家，有着徒手杀死老虎的事迹，空手道神心会的创办人，旗下弟子超过两百万，遍布日本各地。
有一名妻子夏惠，两人没有生子。
第一部在空手道大赛上看出刃牙并不是个简单角色，并轻松打晕末堂厚让其下场。并带领其弟子加藤清澄认识地下后乐园，并解说刃牙的对战。在斗羽被打败时向勇次郎挑战，并在神心会演示实力给刃牙看。在与勇次郎的对战中，起初拥有优势，但在勇次郎展现出“魔鬼的背肌”后陷入劣势，更失去右眼，最后被勇次郎承认并直击心脏而死，随后在医护室被镐红叶救活。在最大格斗大赛中被涉川刚气所击败，但涉川亦说两人年纪如果对调将会是他战败。
第二部开头提到其已被交由愚地克巳的神心会除名，并且到不知何处修行。在德川向五名死刑犯介绍地下格斗场的战士时登场，离开时和死刑犯多利安在街上对决，并被细线切割而失去左腕，之后被密医所医治，两周后在神心会弟子开的游乐场和多利安决战，并让加藤给予其最后一击，使得多利安认输。回家时发现家中被逃离医院的多利安入侵，随后被其藏在右手腕中的炸药直击颜面而重伤。之后在死刑犯铎尔使用粉尘爆炸炸毁神心会总部后向其挑衅并将其打败并送到神心会。在神之子篇先以玩玩的心态和阿里Jr.对决并被击败，在阿里Jr.被涉川打倒之后和其二次对决，并告知他“地下格斗界”的规则并将其狠狠打倒。在阿里Jr.和刃牙决斗前和涉川预测，两人一致同意阿里Jr.会胜出，但预测错误。在第二部结尾时去找刃牙喝茶，并提及两人从未对决的事情，但刃牙邀请独步观赏其和假想勇次郎的对决。
第三部在皮可来到日本时看到报导，而且潜入皮可住处。在之后见识了克巳和皮可的对决，并阻止意图将皮可麻醉的德川。随后和勇次郎在酒吧喝酒并提到皮可复活是否是决定“最强”的契机。之后在路上用“不该存在的技术”给予意图随机杀人的游民致命伤。最大的父子打架时，在旁边的人群中观看两人对决。
第四部在德川府中和宫本武藏挑战，自己的演武被武藏嘲笑并要求武藏使用真刀，被武藏以太刀“压”在脸上而没见血落败。
角色原型是著名空手道家“大山倍达”，神心会的原型则是“极真会馆”。