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加贺美

加贺美圭介(カガミケイスケ，声：小西克幸)

新宿警视厅搜查一课的26岁精英警视。对打击犯罪抱有正义感的年轻人，有一个已经过世的妹妹时子，因为妹妹的死导致加贺美变成怪人二十面相。

事件结束后被逮捕，在狱中表示怪人二十面相还会继续增加。

小林

小林(コバヤシ，声：高桥李依)

生日：9月12日，处女座;身高154cm，体重45kg。

13岁男中学生。对其他人的兴趣极端薄弱，游离于周围的存在，但和同班同学羽柴很亲密。在人间椅子的事件上与明智会面后，志愿成为明智的助手。在人们的眼中他比较中性，小学时代被人曾经误会为女生。完全不介意穿着女装进行调查任务。

理解浪越的想法，要跟他一起寻短时及时被羽柴救下。

原型为原案多部作品登场之侦探助手暨少年侦探团团长小林芳雄。

影男

影男(影男，声：子安武人)

年龄不详的稀代怪盗。经常戴着纸袋的少女爱好者。变装达人，擅于装扮成他人(幼女除外)，但被人知道身份时便会将纸袋戴回头上。

为了将自己的恩人大曾根幸子从诱拐犯手中救出，便与小林接触，并希望其能成为诱饵引出犯人。之后在到达监禁现场后从其他同样被囚的少女口中得知，幸子因反抗诱拐犯而遭杀害。在犯人出现时因愤怒而狂殴他，但反遭殴打，最后在加贺美及中村等警察到达后，自己亦装扮成一名警察流泪离去。

似乎知道明智的一些秘密，有时乔装成他的样子，在明智要去阻止浪越时曾跳出来从旁协助阻挡二十面相的激进信徒。

原型为同名作品之同名反英雄角色。

明智

明智小五郎(アケチコゴロウ，声：樱井孝宏)

生日：1月21日，水瓶座;身高180cm，体重64kg。

本作主角。17岁。宫内厅公认特定未成年少年侦探。经由协助破案而获得国家许可不上学的17岁天才高中生。非常依赖罐装咖啡，并时常服用某种药物，于第四话中可得知服用的药物为Sleep-Aid 10mg，即助眠药物。对猫有恐惧症，小孩也喜欢他。有练过空手道，但碍于身材及体格，打斗后会导致脱臼，第八话中说出其全名为明智小五郎。

性情冷淡而且毒舌，但对想成为助手的小林似乎拿他没有办法，也对小林没经他同意擅闯自己的侦探事务所还有收养猫咪一事显得很无能为力。

为了追捕所有怪人二十面相而成为侦探，知道二十面相的真面目是学生时期已死的挚友浪越感到震惊，但仍誓言阻止他。在浪越的事件后，总算能好好睡眠。

原型为原案多部作品登场之侦探明智小五郎。